2×qPCR SHENmix（荧光探针法）是采用荧光探针法进行 qPCR 扩增 gDNA 或 cDNA的预混试剂，其中包含 DNA 聚合酶、dNTP、反应缓冲液和特异稳定剂等成分，试剂盒单独提供参比荧光染料 100×ROX，可根据实验需要稀释后添加。
PCR 反应液的配制十分方便简单，只需要在 SHEN mix 中加入相应的引物、探针和模板即可。SHENmix 中含有经过专有技术修饰后的热启动 DNA 聚合酶，可以较好地保证 qPCR 分析的准确性和重现性。
n 规格：
1 mL。
规定储存条件下 24 个月，具体见试剂盒标签。
Ø 试剂盒应-18℃及以下、避光保存，尽量避免反复冻融。
Ø 100×ROX 解冻后于 2-8℃、避光保存。
Ø 2×qPCR SHENmix 如在短期内持续使用，可于解冻后 2-8℃、避光保存，且 3 个月内使用完毕。
Ø ABI PRISM 7000/7700/7900HT，7300/7500 定量 PCR 系统
Ø Mx3000PTM 定量 PCR 系统
Ø CFX96 定量 PCR 系统
Ø StepOne Plus Real-Time PCR System
Ø SHENTEK-96S 实时荧光 PCR 检测系统
试剂盒使用前认真阅读以下注意事项：
试剂盒应-18℃及以下、避光保存，请勿反复冻融。
使用前请轻柔颠倒混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。
试剂盒中含有荧光染料，保存或使用时均应避免强光照射。
为保证体系反应效率，所有相关的试验操作请在冰上进行。
若体系中需添加 ROX，添加后应使其充分混匀。
1. 体系配制（仅供参考）
1） 无需添加 ROX
2） 需添加 ROX
根据实际需要使用前可将 100×ROX 用 ddH2O 稀释，如 10×ROX。其终浓度根据所用仪器型号来设定。
v 反应液体积根据所用仪器具体要求而定，一般在 20 μL～50 μL 之间均可。
v 引物所用浓度随引物本身的质量及试剂不同而变化，一般在 0.2 μM～1 μM 之间调整，添加量的不同会影响体系扩增效率，添加量过多，则可能会由于非特异性扩增的原因，出现信号检出率低的情况。
v DNA 模板量通常在 100 ng 以下，过多的模板量会引起基线上飘。不同种类的DNA模板所含拷贝数不同，最佳使用量范围可由梯度稀释实验确定。
2. PCR 反应程序
请根据实际试验情况，选择适合的反应程序：
1） Two –step Real time PCR：
2）Three-step Real time PCR：
初次使用未知引物时， 请首先尝试三步法。退火温度根据引物的 Tm 值在55℃～65℃之间进行调整。
修订时间：2023 年 01 月 16 日
400-829-0116
