n 试剂盒简介
生物制品生产过程中所使用生物源性材料均应进行分枝杆菌检测，分枝杆菌培养法检测耗时，检测周期长达 56 天。而用核酸检测法，如荧光定量 PCR 方法，用时短，可快速检测样品中分枝杆菌污染情况。根据最新的 EP、USP、中国药典等要求，核酸检测方法若经过全面方法验证，可以替代培养法。
MycoSHENTEK®分枝杆菌验证菌株为经培养法测定 CFU（colony forming units），且灭活的分枝杆菌菌液，不适用于培养，无感染风险；每管含 10 CFU 或 100 CFU 分枝杆菌；加入样品基质中即可使用。
湖州申科同时提供 MycoSHENTEK®分枝杆菌 DNA 提取纯化试剂盒（磁珠法）和 MycoSHENTEK®分枝杆菌 DNA 检测试剂盒（PCR-荧光探针法），用于分枝杆菌 DNA 的提取和 PCR 检测。
n 试剂盒组分
n 有效期
新金色分枝杆菌验证菌株规定储存条件下 6 个月，具体见标签。
草分枝杆菌验证菌株规定储存条件下 12 个月，具体见标签。
n 实验所需但试剂盒中未含材料
Ø 1.5 mL 无菌无 DNA 或 RNA 的低吸附离心管
Ø 96 孔 qPCR 板或八联管
Ø 1000 μL，200 μL，100 μL，10 μL 无菌无 DNA 或 RNA的低吸附带滤芯枪头
Ø 荧光定量 PCR 仪
Ø 1000 μL，200 μL，100 μL，10 μL 移液枪
1. 在 2-8 ℃条件下融化分枝杆菌验证菌株。
2. 在涡旋振荡器上旋涡振荡 10 秒，瞬时离心 3 秒。
3. 根据标签上验证菌株的体积，在每管中加入适当体积的样品基质，根据所需要达到的浓度加入对应的体积。
4. 在涡旋振荡器上旋涡振荡 10 秒，瞬时离心 3 秒。
5. 提取 DNA 后，采用定量 PCR 系统进行 PCR 检测。
注：
1) 每种规格的菌株都不能稀释，稀释会引起菌体分布不均匀从而产生未检出风险。
2) 所有的试剂和样品在使用前必须平衡到室温。强烈建议在 PCR 前对样品进行适当的 DNA 提取，以减少 PCR 抑制的风险，并最大限度地提高灵敏度。
3) 对于 10 CFU/管的菌株，为提高检出率，实验操作建议如下：
·在 2-8 ℃条件下融化分枝杆菌验证菌株（10 CFU）。
·在每管中加入适当体积的样品基质，补足到总体积为 500 μL。
·在涡旋振荡器上旋涡振荡 10 秒，瞬时离心 3-5 秒。
·按照说明书方法进行 DNA 提取。
·提取 DNA 后，采用定量 PCR 系统进行检测。
1. 勿将不同批次试剂混合使用。
2. 不得使用超过保质期的试剂。
3. 与产品使用说明不符的任何操作都可能影响结果。
4. PCR 的抑制可能是由样品基质引起的，阴性对照应用相同的样品基质进行处理。
5. 对于每次样品检测，应至少检测一个阴性对照。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究和质量控制，不得用于临床诊断或治疗。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
修订日期：2023 年 05 月 05 日
生效日期：2023 年 05 月 08 日
400-829-0116
